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Macau Periodical Index (澳門期刊論文索引)

Author
吳許文;李沛樟;倪金良;簡仕銘;王明彥
Title
血液中大腸菌、肺克菌、金葡菌及甲氧西林抗性金葡菌的多重PCR檢測方法建立
Journal Name
鏡湖醫學
Pub. Info
2015年12月, 總第33期, 第15卷第2期, 第8-13頁
Link
http://www.kwh.org.mo/download/med33.pdf
Keyword
多重PCR;敗血症;大腸埃希菌;肺炎克雷伯菌;金黃色葡萄球菌;MRSA
Abstract
目的:敗血症是由多種致病菌引起的綜合症,致病菌包括大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌及甲氧西林抗性金葡菌(MRSA),因此探索建立本院多重PCR方法,快速檢測血液中上述常見致病菌,有利於败血症的及時治療。方法:本實驗針對大腸埃希菌phoA基因、肺炎克雷伯菌mdh基因、金黃色葡萄球菌femA基因和MRSA mecA基因進行檢測,並用16S rDNA為致病菌感染對照。結果:採用建立的多重PCR方法對15種致病菌的20個菌株進行檢測,特異性100%,而檢測限為大腸埃希菌2.75×102CFU/mL,肺炎克雷伯菌2.43×103CFU/mL,金黃色葡萄球菌3.13×102CFU/mL和MRSA3.03×102CFU/mL;用多重PCR方法和傳統血培養方法對300個血標本進行檢測,傳統血培養方法有187個陽性,多重PCR方法有4個為假陰性,未能被檢測。結論:建立的多重PCR方法可簡便、及時的檢測血液感染中的大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌和MRSA。 段落標題: 1. 資料與方法 1.1. 臨床資料 1.2. 方法 2. 結果 2.1. 單一基因PCR結果 2.2. 多重PCR條件優化 2.3. 多重PCR特異性試驗 2.4. 多重PCR的敏感性 2.5. 驗證試驗 2.6. 多重PCR方法和傳統血培養方法檢測時間比較 3. 討論 附表: 1. 多重PCR方法和傳統血培養方法檢測時間比較 2. 多重PCR特異性結果 3. 多重PCR方法與血培養方法的檢測結果 4. 多重PCR方法和傳統血培養方法檢測時間比較 附圖: 1. EC、KP、MRSA、SA單一基因PCR電泳結果M: DNA Marker DL2000; N: negative control; 1: EC ATCC25922;2: KP ATCC700603; 3: MRSA ATCC33591; 4: SA ATCC29213; 5:EC ATCC25922; 6: KP ATCC700603; 7: MRSA ATCC33591; 8: SA ATCC29213 2. EC、KP、SA、MRSA多重PCR電泳結果M: DNA Marker DL2000; 1:EC ATCC25922; 2:KP ATCC700603; 3:SA ATCC29213; 4:MRSA ATCC33591; 5: EC ATCC25922,KP ATCC700603,SA ATCC29213和MRSA 3. 多重PCR的敏感性檢測 ATCC33591