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Macau Periodical Index (澳門期刊論文索引)
- Author
- 孟麗榮;張淑蘭;魯豔明
- Title
- KiSS-1 基因轉桨子宮內膜癌 HEC-1B 細胞系研究
- Journal Name
- 澳門醫學雜誌
- Pub. Info
- 2007年12月20日, 第7卷第4期, 第216-220頁
- Link
- https://www.ssm.gov.mo/docs//2211/2211_3114b95f078741339a3d72374887502d_000.pdf
- Keyword
- 子宮內膜癌;細胞系;KiSS-1;MMP-9;質粒;轉染;轉移
- Abstract
- 摘要 : 侵襲和轉移惡性腫瘤的基本生物學特徵,也是臨床上絕大多數腫瘤患者的致死因素。KiSS-1是腫瘤轉移抑制基因,近年來的研究證明它的表達缺失與乳腺癌、黑色素瘤、膀胱癌等腫瘤的侵襲和轉移密切相關。目的:構建 KiSS-1 基因質粒並將 KiSS-1 基因質粒導入子宮內膜癌細胞 HEC-1B 中,建立穩定、高效、低毒的轉染方法,觀察其轉染率、表達情況。方法:採用基因轉化技術用陽離子脂質體介導將高純度的 KiSS-1 質粒轉染到子宮內膜癌細胞株中。用 RT-PCR 和 western blot 技術檢測轉染前後腫瘤細胞的 KiSS-1 mRNA、MMR-9mRNA 和其蛋白 metastine 的表達。結果:1 使用重組的真核表達載體,將 KiSS-1 基因轉染到子宮內膜癌細胞中,並獲得穩定表達。2 子宮內膜癌細胞 KiSS-1 基因轉染前後表達水平有明顯差異。3 轉染後的子宮內膜癌細胞的 MMP-9mRNA 表達下調。結論:1 利用脂質體作為載體將 KiSS-1 基因轉染到子宮內膜癌 HEC-1B 細胞是可行、有效和穩定的。2 轉染後細胞的 KiSS-1 mRNA 表達明顯增強,MMP-9mRNA 的表達明顯降低。3 KiSS-1 基因可能參與抑制子宮內膜癌細胞的侵襲和轉移,可考慮為子宮內膜癌基因治療的一個有意義的基因。 段落標題: 1. 材料和方法 2. 結果 附表: 1. 目的基因 KiSS-1、MMR-9 及內參照基因β-actinPCR 引物序列及產物大小 附圖: 1. 質粒 PCR 電泳結果 2. M 代表 DL2000;1 代表 HEC-1B 細胞 3. 三組細胞 KiSS-1 基因的電泳結果 4. Western Blot 方法檢測蛋白的表達 5. 對照組 細胞培養 x 10 6. 對照組 細胞培養 x 40 7. G418 結胞篩選初期 x 10 8. G418 結胞篩選中晚期 x 10 9. G418 結胞篩選克隆形成 x 10 10. G418 結胞篩選克隆形成 x 40