school
Macau Periodical Index (澳門期刊論文索引)
- Author
- 王丹芬；楊子峰；李佩瓊；關文達；秦笙；莫自耀；陳曉紅；何蘊韶；鍾南山
- Title
- 甲型流感病毒的分子檢測及其基因分型的方法學研究
- Journal Name
- 澳門科技大學學報
- Pub. Info
- 2009年6月30日, 第3卷第1期, 第27-31頁
- Keyword
- 多重PCR；甲型流感病毒；檢測；基因分型
- Abstract
- 摘要 : 建立一種快速、特異、靈敏的檢測甲型流感病毒核酸並對其進行基因分型的多重PCR方法。方法：根據Genebank登錄的甲型流感毒株序列，應用生物軟件在甲型流感病毒的膜蛋白(Matrix Protein)基因和血凝素(Hemagglutinin, HA)基因的保守區域設計引物，對多重PCR反應體系與條件進行優化，驗證方法的特異性和敏感性，並模擬在病人感染一種或多種甲型流感病毒亞型狀態下的標本進行檢測，以評價該方法的臨床應用價值。結果：該方法對甲型流感病毒的檢測具有特異性，對乙型流感病毒、副流感病毒3型、呼吸道合胞流病、鼻病毒和腺病毒3型等其他呼吸道病毒均無交叉反應，檢測靈敏度為10(2)~10(3) copies/ul，能準確檢測出模擬病人感染一種或多種甲型流感病毒亞型狀態下的標本中的甲型流感，並對其進行正確的分型。結論：本研究建立的檢測甲型流感病毒核酸並對其進行基因分型的多重PCR方法具有特異、靈敏的特點，為該方法的後續臨床應用奠定基礎。 段落標題： 1. 引言 2. 材料與方法 2.1. 材料 2.2. 引物設計 2.3. 多重PCR擴增條件的優化 2.4. 多重PCR特異性的鑒定 2.5. 多重PCR靈敏度的檢測 2.6. 模擬甲型流感病毒單一亞型感染和多重亞型感染狀態下的多重PCR反應 3. 結果 3.1. 多重PCR特異性的鑒定 3.2. 多重PCR靈敏度的檢測 3.3. 模擬甲型流感病毒單一亞型感染和多重亞型感染狀態下的多重PCR反應 4. 討論 附表： 1. 多重PCR引物的序列、靶基因及其產物大小 2. 多重PCR對不同靶基因的檢測靈敏度 附圖： 1. 多重PCR特異性鑒定的電泳圖 2. 模擬甲型流感病毒單一亞型感染狀態下的多重PCR擴增電泳圖 3. 模擬甲型流感病毒多重亞型感染狀態下的多重PCR擴增電泳圖